無菌包裝常見的滅菌方式有幾種，而蒸汽滅菌（即濕熱滅菌）是最常見的非工業基礎滅菌方式。在滅菌過程中，包裝被放置在一個充滿蒸汽和適度壓力的密閉環境中，環境的溫度一般控制在121-132攝氏度之內。這個過程跟輻射滅菌有點相似，但是不同的是這種方式利用的是高溫蒸汽，需要無菌包裝的材料必須是多孔的，且允許蒸汽自由通過。這種滅菌方式最常用的包裝材料通常是Tyvek特衛強蓋材和吸塑盒結合。

當使用蒸汽滅菌時，一個需要重點考慮的事項就是評估濕熱與用于將蓋材和吸塑盒粘合的粘合劑之間的相互作用，如果粘合劑不是耐高溫和潮濕的，那么無菌包裝的無菌屏障系統可能就會受到損害。

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